小量細菌質體DNA的製備及其定量 | 私立大學五星教授網

萃取質體DNA的方法很多，最常用的 是鹼性溶解法(alkaline lysis) 及煮沸法 (boiling method) 。 鹼性溶解法(alkaline lysis) 原理是利用鹼處理質體DNA和染色 體DNA，使兩者雙股打開呈單股狀 態，再加入酸中和鹼使得單股DNA 回復成為雙股DNA。

質體DNA在中和後可以恢復原狀，而大部分細菌染色體DNA 無法復原，並與SDS-K+所形成的複合物一起沉澱，藉由離心去除之，再以酒精 或異丙醇將上清液的質體DNA沉澱，即可得到 ...

*Washing buffer中含有高濃度乙醇，乙醇會影響DNA品質，並抑制後續的酶作用反應，在elution前需將乙醇完全去除。

2.1. 質體 DNA 之小量分離法. 回目錄. 這個實驗是以alkaline lysis 的方法進行，其原理是將細菌以NaOH 及SDS 分解，並使蛋白質及DNA 變性，繼之以酸中和。

核酸萃取的流程及方法​ 利用裂解液(lysis buffer) 和/或加熱破壞細胞膜及核膜等含有遺傳物質的結構。 裂解液通常含有SDS，並可依目標樣品特性加入(a)酵素，如蛋白酶K 、(b) ...

1.取適量質體DNA與1管勝任細胞混合均勻（比例不要超過1/10，否則會降低效率） · 2.進行電衝 · 3.迅速加入SOC 1 ml · 4.迅速將cuvette中的菌液轉移至新的微量離心管中 · 5.置於37℃ ...

利用DNA Extraction solution (Strategene)，步驟如下: 將4 ~ 6 ml 的全血置於15 ml 離心管中，加入solution I至15 ml，翻轉數次使混 合均勻；置於冰上5 ~ 10 分鐘，以2, ...

目前已發展出許多可用來抽取或純化質體DNA的方法，包括鹼性裂解法、煮沸法、氯化銫純化法及商業化套件等。 其中鹼性裂解法為一種效率較高且較簡易的方法，主要原理為利用 ...

Multiple Cloning Site (MCS). 短片段DNA包含多個限制酶位點，可插入DNA(insert Gene)，於表達質體中，MCS通常位於啟動子下游 ; Insert. 目標基因、啟動子或是其它DNA片段被 ...

使用Invitrogen PureLink HiPure Expi Plasmid Megaprep Kit，只需90分鐘即可分離出轉染等級的質體DNA。這些試劑盒中配載了新型專利陰離子交換樹脂，具備高流速、高解析度及 ...