反轉錄 | 私立大學五星教授網

在這種方法中，RNA首先透過反轉錄酶（reverse transcriptase）從total RNA或messenger RNA（mRNA）轉錄成互補DNA（cDNA）。 之後cDNA將作為qPCR反應的模板。 RT-qPCR可用於各式應用，包括基因表現分析、RNAi驗證、微陣列驗證、病原體檢測、基因檢測和疾病研究。

由於RNA 極度不穩定，因此萃取RNA 後需要進行反轉錄反應(Reverse transcription, RT)，也就是將RNA 反轉錄成較穩定的complementary DNA (cDNA)。Solis BioDyne 即提供方便 ...

2022年5月17日 — 以生物细胞的总mRNA 为模板，用反转录酶合成互补的双链cDNA ，然后接到载体上，转入到宿主后建立的基因文库就是cDNA 文库。 1、mRNA的提取及其完整性的 ...

下一步，RNA依賴性DNA聚合酶活性透過摻入反應混合物中的dNTP來合成cDNA。反應生成得到cDNA:RNA雜交體，此過程稱為第一鏈cDNA合成。如果反轉錄酶具有RNase H活性（如原生 ...

2019年11月10日 — 直接轉cDNA (TAKARA SMARTer v4). 細胞數. 104-106. 5x104-106. 100 ... 只有完整具poly A之RNA被轉成cDNA，因此大多cDNA完整度佳，但濃度過低時 ...

2010年1月30日 — ... 抽RNA 所抽出來的不是total RNA嗎? 之後再用oligodT去轉cDNA 所轉出的應該是total mRNA吧? 也就是說那管cDNA中包含著1.因藥物處理導致A gene表現產生的 ...

(建議送樣濃度：10 ng/μL；濃度推算方式：進行RT時加入之RNA總量除以最終反應體積。例如, 取1μg RNA在20ul反應體系下轉cDNA，則濃度為1μg/20μL=50ng/μL)。 注意：如單 ...

2013年9月6日 — 第一节概述从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增,即可获得cDNA文库, ...

可做多少cDNA? 106 cells 可抽到10-35 μg total RNA，如:NIH/3T3可抽取到10μg total RNA，Hela可抽取到 ...

注意：不可以使用真空抽乾，將會使RNA pellet 過度乾燥 ... • 高靈敏度，只要50 pg的total RNA高效產生cDNA， ... 需要轉. 錄缺少或極短的polyA tail的mRNA(例如細菌的 ...